詳細了解生物顯微鏡及其應(yīng)用

生物顯微鏡是對細胞，組織進行觀察和研究的重要儀器。生物顯微鏡按其性能可分為普通光學(xué)顯微鏡和精密度很高的電子顯微鏡。在解剖學(xué)實驗中，主要介紹普通光學(xué)顯微鏡。光學(xué)顯微鏡是觀察人體微細結(jié)構(gòu)的常規(guī)儀器。了解和掌握顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用方法是學(xué)習(xí)人體形態(tài)結(jié)構(gòu)的有效方法之一。通過顯微鏡可以觀察細胞的基本結(jié)構(gòu)和人體各組織，器官的微細結(jié)構(gòu)，使學(xué)習(xí)者能更直觀的掌握人體的結(jié)構(gòu)和功能，對其他課程的學(xué)習(xí)起促進作用。

原理

1，成像：由外界入射的光線經(jīng)反光鏡發(fā)射向上，或由內(nèi)光源發(fā)射的光線經(jīng)聚光鏡聚在標(biāo)本上，使標(biāo)本有足夠的照明，由標(biāo)本反射或折射的光線經(jīng)物鏡進入光軸與水平面傾斜45度的棱鏡，在目鏡的視場光闌處，成放大實像，此實像經(jīng)目鏡的接目透鏡放大成虛像，所以人們看到的是虛像。

2，放大倍數(shù)：標(biāo)本經(jīng)生物顯微鏡的目鏡與物鏡放大后的總放大倍數(shù)是顯微鏡與目鏡放大倍數(shù)的乘積。

3，分辨率：對任何顯微鏡來說，分辨率是最重要的性能參數(shù)。光學(xué)生物顯微鏡的分辨率D與光波波長γ，物鏡鏡口角α和介質(zhì)折射率n有關(guān)。因此，光學(xué)顯微鏡中，γ越短，n和α越大，則D值越低，分辨率就越高。通常情況下，α最大值可達到140度，空氣中n=1，最短的可見光的波長為450毫米。因此，根據(jù)不同的α和γ，可以得到不同的分辨率來觀察樣本。最常用的普通光學(xué)顯微鏡的最大分辨率為0.2μm（也就是指區(qū)分兩個質(zhì)點的最小距離是0.2μm），最大放大倍數(shù)可達1000~1500倍，其他顯微鏡都是在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。

4，樣品要求：普通光學(xué)生物顯微鏡是利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化來觀察的，因而對樣品有較高的要求。觀察樣品通常要經(jīng)過固定劑固定、包埋劑包埋后，切成厚度為5μm左右的薄片，經(jīng)染色后才能觀察，對于活細胞或未經(jīng)染色的細胞不能進行觀察。